Juffertje-in-’t-groen is een kruid van 20 tot 45 centimeter hoog, met een geribde stengel en dunne bladeren. De bloemen zijn helderblauw, ongeveer vier centimeter breed en omgeven door een krans van dunne, draadachtige schutbladeren. Ze hebben zowel mannelijke als vrouwelijke geslachtsorganen en bloeien van juni tot augustus. Honingklieren in de bloemen trekken hommels en bijen aan, die zorgen voor de bestuiving. Na de bevruchting ontstaan ballonvormige vruchten, waarin meerdere zwarte zaden zitten.